ماهي مراحل التضخيم التسلسي لأنزيم البوليميراز؟

اولا يرتبط

ثانيا تحدث الاستطالة

واخيرا ينفك الارتباط عن الحمض النووي

1- الحصول علي دي ان ايه

2- فصل دي ان ايه الي سلسلتين بالتسخين

3- اضافة البادئ

4- اضافة انزيم دي ان ايه البوليميراز الذي سيبني الدي ان ايه الجديد

1. مرحلة المسخ او التفكك : وتحدث في درجة حرارة بين 94-98 م حيث يبدأ شريط DNA بالانقسام إلى خيطين منفصلين عن بعض وتحدث خلال فترة زمنية بين 1 - 9 دقائق
2. مرحلة الالتصاق : وفي هذه المرحلة يبدأ البادئ بالاتصاق على خيط DNA وتتم بدرجة حراريه اقل من مرحلة التفكك 50 - 65 ° س، وتتم تقريباً خلال ٥ ثواني
3. مرحلة التمدد او البناء : تعد هذه المرحلة الاخيرة في عملية المسخ وتحدث في درجة 75–80 °س، وهذه هي الدرجة الحرارية المناسبة لعمل الانزيم DNA polymerase لتقوم ببناء خيط الحامض النووي الجديد

التفكك,البناء, الاستطالة باختصار

مرحل فصل شريط DNA برفع دجة الحراره 90

مرحلة الالتصاق بالبرايمر الحراره بين 40-60

مرحلة الاستطالة كل شريط على حده وتكوين  نسختين DNA وتكون في درجة حراره 70 

اولا فك التحلزن وثانيا تموضع البادءات واخيرا الاستطاله

1. 1- الحصول ADN

   2- فصل ADN الي سلسلتين بالتسخين

   3- اضافة البادئ.

   4- اضافة انزيم ADNpoly

هي مرحله يتم فيها تكثير المنطقه المراد دراستها او استخدامها في البصمه الوراثيه 

و تتم على ثلاثه مراحل 

أولا مرحله التفكيك حيث يتم رفع درجه الحراره الى 95 -100 درجه حيث يتم تفكيك الروابط الهدروجينيه ومنها فصل الدي ان اي

ثانيا : مرحله الارتباط وفيها يتم خفض درجه اللحراره ليتم ارتباط البرايمرات او البادئات و تكون غالبا 55 درجه

ثالثا وضع درجه الحراره المثلى لعمل انزيم البولميرايز ليتم تكثير المنطقه المرغوبه بنسخها

polymerase amplification: (denaturation, amplification and extension)

فك التلاحم بين خطين الحامض النووى

و اعادة التحامهما بعد تكوين الجزء المطلوب

تكوين قطع جديده مماثلة للنسخة الاصلية من الجين

تاكيد على جودة القطع الجديدة من الحامض النووى.