ماهو مبدأ تحاليل ال elisaالمخبرية ؟

مبدأ عمل تقنية ELISA تستند هذه التقنية على مبدأ Enzyme immunoassay EIA. في هذه التقنية تثبت الاضداد او المستضدات في حفر صفيحة بلاستيكية تدعى Microtiter plate. توضع عينات مصل المرضى وعينات السيطرة في حفر الـ microtiter plate فيحدث ارتباط بين الاضداد و المستضدات. و بعد ساعة من الحضانة في درجة حرارة الغرفة، تغسل الـصفيحة بواسطة محلول غسل خاص لازالة المواد غير المرتبطة. بعد ذلك يضاف انزيم مرتبط بجزيئة الضد Enzyme conjugate و يحضن لمدة نصف ساعة. وبعد خطة غسل اخرى يتم اضافة المادة الاساس Substrate وتحضن الصفيحة لمدة20 دقيقة ، حيث يظهر لون (أزرق عادة) في الحفر. ثم يضاف بعد ذلك محلول Stop solution حيث يتغير اللون من الازرق الى الاصفر. تقاس شدة اللون باستخدام جهاز المطياف بطول موجي450 nm. يتناسب تركيز الضد او المستضد المراد قياسه مع شدة اللون تناسبا طرديا. 

ب اختصار شديد تحاليل الاليزا عبارة عن Ab_Ag Reaction اللي بيحصل اي ان ال well اللي بيتم فيها التفاعل دي بتكون Coated من الداخل ب ال Ab تمام كدا وحضرتك بتضيف ال Ag من السيرم بتاع المريض ف هنا اللي بيحصل ان لو السيرم فيه فعلا Ag هتمسك مع ال Ab وتكون Ab _ Ag Complex بعد كدا بنعمل Wash عشان يزيل اي حاجه تانيه ممسكتش مع ال Ab طبعا احنا مش محتاجينها بعد ما بنغسل كدا بنضمن ان ال well مفهاش غير ال Ab _ Ag Complex بتاعنا نيجي بعد كدا نربطه ب Enzyme يمسك ف ال Complex بتاعنا بعد كدا نعمل Wash عشان نزيل اي زياده من ال Enzyme بعد كدا بنضيف ماده ال TMP Substrate اللي بترتبط بنهاية الانزيم بعد كدا بنضيف ال Stop solution عشان يوقف التفاعل لان لو مضيفتش ال Stop solution هيفضل التفاعل مكمل معايا فكان لازم أوقفه وبعد كدا نقيس ع الجهاز ودي بنسميها ف الاليزا طريقة السندوتش دا باختصار شديد اللي بيحصل ف ال well بتاعنا

 مع الانتيجينات تفاعل الاجسام المضادة 

ابحث عن عمل كفني مخبر انا سوري واعيش في تركيا متخرج من جامعة دمشق معهد طبي 2017